一:
pcr分析系統(tǒng)技術(shù)百科
問(wèn)題1:PCR的基本原理是什么?其基本流程如何?
答:一、基本原理:PCR技術(shù)的基本原理類(lèi)似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴(lài)于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下。
問(wèn)題2:PCR實(shí)驗(yàn)室的都需要什么設(shè)備?
答:純水裝置:用于PCR,DNA測(cè)序需要超純水產(chǎn)物分析區(qū):電泳儀:水平電泳用于核酸DNA/RNA檢測(cè),垂直電泳用于蛋白檢測(cè),轉(zhuǎn)印電泳用于將蛋白轉(zhuǎn)移到膜上做weatern檢測(cè)凝膠成像系統(tǒng)/紫外檢測(cè)儀:用于核酸瓊脂電泳和蛋白聚丙酰胺的觀察和。
問(wèn)題3:RT-PCR的原理是什么?有何用途?
答:該技術(shù)主要用于:分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構(gòu)建RNA高效轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。RT-PCR(ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction)即逆轉(zhuǎn)錄PCR,是將RNA的反轉(zhuǎn)錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的。
問(wèn)題4:rapdpcr數(shù)據(jù)怎么分析
答:④較之常規(guī)PCR,RAPD反應(yīng)易于程序化。利用一套隨機(jī)引物,得到大量DNA分子標(biāo)記,可以借助計(jì)算機(jī)進(jìn)行系統(tǒng)分析。2RAPD分析的優(yōu)越性和不足,RAPD是一種全新且有效的遺傳標(biāo)記,與其他分子標(biāo)記相比,具有許多優(yōu)越之處:①合成一套。
問(wèn)題5:PCR的原理是什么,它有什么用途
答:PCR的原理是利用DNA在體外攝氏95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單鏈,低溫(經(jīng)常是60°C左右)時(shí)引物與單鏈按堿基互補(bǔ)配對(duì)的原則結(jié)合,再調(diào)溫度至DNA聚合酶最適反應(yīng)溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成。
問(wèn)題6:實(shí)時(shí)定量PCR的結(jié)果是怎樣分析的
答:1、如果有標(biāo)準(zhǔn)曲線,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算。2、一般都是相對(duì)量,則用deltadeltaCT方法來(lái)計(jì)算。3、舉例如下:對(duì)照組基因A的CT值為20,內(nèi)參(比如βactin)CT值15。實(shí)驗(yàn)組基因ACT值18,內(nèi)參CT值14。4、首先算加樣量:。
問(wèn)題7:xpert檢測(cè)是什么pcr方法
答:方法采用雙拭子蘸取臨床未成形糞便標(biāo)本,一支拭子用于GeneXpert實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)艱難梭菌毒素基因tcdB,另一支用于常規(guī)厭氧菌培養(yǎng)檢測(cè);對(duì)GeneXpert實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果與常規(guī)厭氧菌培養(yǎng)結(jié)果的一致性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,并計(jì)算Gene。
問(wèn)題8:pcr原理是什么?
pcr分析系統(tǒng)答:PCR技術(shù)的基本原理類(lèi)似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴(lài)于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈,在DNA聚合酶的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)。
問(wèn)題9:pcr技術(shù)基本原理
pcr分析系統(tǒng)答:RT-PCR使RNA檢測(cè)的靈敏性提高了幾個(gè)數(shù)量級(jí),使一些極為微量RNA樣品的分析成為可能,該技術(shù)主要用于分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構(gòu)建RNA高效轉(zhuǎn)錄系統(tǒng)。逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)體系1RNA模板通常20μL的逆轉(zhuǎn)錄體系,加入總RNA。
問(wèn)題10:熒光定量pcr原理
答:熒光定量PCR的應(yīng)用1、核酸定量分析對(duì)傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的檢測(cè)。2、基因表達(dá)差異分析比較經(jīng)過(guò)不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等),特定基因在不同。
二:
pcr分析系統(tǒng)技術(shù)資料
問(wèn)題1:熒光定量pcr原理
答:熒光定量PCR的應(yīng)用1、核酸定量分析對(duì)傳染性疾病進(jìn)行定量定性分析,病原微生物或病毒含量的檢測(cè)。2、基因表達(dá)差異分析比較經(jīng)過(guò)不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等),特定基因在不同。
問(wèn)題2:PCR的原理是什么的原理是什么,它有什么用途
答:PCR全稱(chēng)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),原理是DNA的體外擴(kuò)增。具體來(lái)說(shuō):在EP管里加入DNA、合成原料(dNTP、引物)、耐熱的DNA聚合酶(taq)后,放入PCR儀,PCR儀會(huì)利用升溫使DNA變性,在聚合酶的作用下使單鏈復(fù)制成雙鏈,進(jìn)而達(dá)到基因。
問(wèn)題3:融合PCR的操作原理及注意事項(xiàng)
pcr分析系統(tǒng)答:實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)1、戴一次性手套,若不小心濺上反應(yīng)液,立即更換手套。2、使用一次性吸頭,嚴(yán)禁與PCR產(chǎn)物分析室的吸頭混用,吸頭不要長(zhǎng)時(shí)間暴露于空氣中,避免氣溶膠的污染。3、避免反應(yīng)液飛濺,打開(kāi)反應(yīng)管時(shí)為避免此種。
問(wèn)題4:pcr的技術(shù)的主要步驟及pcr引物設(shè)計(jì)的一般原則有哪些
pcr分析系統(tǒng)答:PCR的技術(shù)的主要步驟及PCR引物設(shè)計(jì)的一般原則分述如下:PCR的技術(shù)的主要步驟:1、DNA變性:(90℃-96℃):雙鏈DNA模板在熱作用下,氫鍵斷裂,形成單鏈DNA。2、退火:(60℃-65℃):系統(tǒng)溫度降低,引物與DNA模板結(jié)合。
問(wèn)題5:RocheLC480熒光定量PCR儀-北京強(qiáng)欣博瑞
pcr分析系統(tǒng)答:羅氏LC480實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀RocheLightCycler® 480熒光定量系統(tǒng)可以讓你實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)在線的高通量快速熒光定量PCR循環(huán),可同時(shí)檢測(cè)96或384孔板樣品。結(jié)果可以通過(guò)PCR循環(huán)過(guò)程中實(shí)時(shí)熒光采集和軟件分析進(jìn)行定量和基因型的。
問(wèn)題6:請(qǐng)問(wèn)PCR檢測(cè)是什么意思?
pcr分析系統(tǒng)答:回答:何謂pcr檢測(cè)定量PCR技術(shù)有廣義概念和狹義概念。廣義概念的定量PCR技術(shù)是指以外參或內(nèi)參為標(biāo)準(zhǔn),通過(guò)對(duì)PCR終產(chǎn)物的分析或PCR過(guò)程的監(jiān)測(cè),進(jìn)行PCR起始模板量的定量。廣義概念下的定量PCR技術(shù)可以分為五種類(lèi)型:(1)外參法+終。
問(wèn)題7:實(shí)時(shí)定量PCR的結(jié)果是怎樣分析的?
答:的探討實(shí)時(shí)熒光定量PCR不同結(jié)果分析模式對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。方法用Line—GeneFQD-33A型熒光定量PCR檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)本院門(mén)診和病房乙肝病人血清HBVDNA77份,分別用最大二階導(dǎo)數(shù)法和樣點(diǎn)擬合法進(jìn)行結(jié)果分析。結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種分析。
問(wèn)題8:細(xì)胞的支原體檢測(cè)——PCR法
pcr分析系統(tǒng)答:(一)材料與設(shè)備支原體PCR檢測(cè)試劑盒、dNTP、TaqDNA聚合酶、緩沖溶液、瓊脂糖、礦物油、超凈工作臺(tái)、PCR儀、電泳儀、凝膠成像分析系統(tǒng)、臺(tái)式離心機(jī)、旋渦混旋器等。(二)操作步驟1樣品的收集。待測(cè)細(xì)胞用無(wú)雙抗。
問(wèn)題9:恒溫PCR和實(shí)時(shí)熒光定量PCR這兩種有什么區(qū)別?哪個(gè)更有優(yōu)勢(shì)?
pcr分析系統(tǒng)答:恒溫PCR主要是,確定是否存在一段特異的DNA序列。但是熒光定量PCR是看溶液中特異的PCR序列的濃度。兩者沒(méi)有什么優(yōu)勢(shì)。一般的可能就是功能簡(jiǎn)單但是便宜。主要是便宜熒光的很貴很貴不是一般的貴!!實(shí)時(shí)熒光PCR方法靈敏度略。
問(wèn)題10:qpcr原理及應(yīng)用是什么?
pcr分析系統(tǒng)答:1、基因表達(dá)分析:例如結(jié)核分岔?xiàng)U菌(Mycobacteriumtuberculosis)是一種生長(zhǎng)相當(dāng)緩慢的細(xì)菌,傳統(tǒng)培養(yǎng)及鑒定一般需要花數(shù)周時(shí)間。2015年時(shí)WatanabePinhata和Cergole-Novella以自己發(fā)展的realtimePCR檢測(cè)mpt64,直接檢測(cè)病人痰液。
三 :