一：
熒光定量pcrct技術(shù)百科
問題1：熒光定量PCR的CT過小是為什么啊,不是說基準(zhǔn)線是3到15個循環(huán),出現(xiàn)在這個
答：這是因為DNA復(fù)制量未達(dá)到儀器檢測到的水平，但實際PCR循環(huán)卻真實進(jìn)行，反映在儀器曲線上為基線，直到量變達(dá)到質(zhì)變時，才會被儀器檢測到，變成指數(shù)增長期。
問題2：什么是實時熒光定量PCR,檢測指標(biāo)是什么?
答：實時熒光定量PCR(realtimefluorescencequantitativePCR，RTFQPCR)是1996年由美國AppliedBiosystems公司推出的一種新定量試驗技術(shù)，它是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應(yīng)。
問題3：實時熒光定量pcr因子表達(dá)量越少ct值越小嗎
熒光定量pcrct答：所謂Ct值，就是最先出現(xiàn)超過閾值信號的那個循環(huán)數(shù)?；蛘哒f是到了第幾個循環(huán)才出現(xiàn)超過閾值的信號。C代表的是cycle，循環(huán)數(shù)目，T代表的是threshold,閾值。所以表達(dá)量越少的話，需要越多的循環(huán)才能擴(kuò)增出來。也就是CT值越高。
問題4：實時熒光定量PCR的原理
熒光定量pcrct答：所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。檢測方法1SYBRGreenⅠ法：在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光。
問題5：實時熒光定量PCR與普通PCR的區(qū)別是什么?結(jié)果有何異同?能說明的問題是什
答：實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強(qiáng)度，并記錄在電腦軟件之中，通過對每個樣品Ct值的計算，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。參考資料來源：百度百科-實時熒光定量PCR參考資料來源：百度百科-PCR。
問題6：求助熒光定量PCR,我的實驗組和對照組的目的基因CT值非常相近,但是兩組
答：肯定不行的。熒光定量pcr通過以內(nèi)參基因作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相對定量，即眾所周知的2–ΔΔCT法，（前提是要求在所有測試樣本中恒定表達(dá)的已知參照基因，而且表達(dá)水平不受研究條件及處理方式的影響）。如果實驗組和對照組的目的基因。
問題7：實時熒光定量PCRCT值偏大的原因是什么
答：CT值偏大是因為擴(kuò)增產(chǎn)物量低引起的，而后者的原因很多，比如底物濃度低，引物效率低，有抑制反應(yīng)的物質(zhì)存在等等。
問題8：實時定量PCR的結(jié)果是怎樣分析的
答：1、如果有標(biāo)準(zhǔn)曲線，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算。2、一般都是相對量，則用deltadeltaCT方法來計算。3、舉例如下：對照組基因A的CT值為20，內(nèi)參（比如βactin)CT值15。實驗組基因ACT值18，內(nèi)參CT值14。4、首先算加樣量：。
問題9：熒光定量PCR的簡單解釋
熒光定量pcrct答：熒光定量PCR是(realtimefluores-cencequantitativePCR，RTFQPCR)是1996年由美國AppliedBiosystems公司推出的一種新定量試驗技術(shù)，它是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實時在線監(jiān)控反應(yīng)。
問題10：實時熒光定量pcr因子表達(dá)量越少ct值越小嗎
熒光定量pcrct答：所謂Ct值，就是最先出現(xiàn)超過閾值信號的那個循環(huán)數(shù)?；蛘哒f是到了第幾個循環(huán)才出現(xiàn)超過閾值的信號。C代表的是cycle，循環(huán)數(shù)目，T代表的是threshold,閾值。所以表達(dá)量越少的話，需要越多的循環(huán)才能擴(kuò)增出來。也就是CT值越高。
二：
熒光定量pcrct技術(shù)資料
問題1：熒光定量pcrct值每次重復(fù)相差多少
熒光定量pcrct答：如果有標(biāo)準(zhǔn)曲線，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線計算。一般都是相對量。則用deltadeltaCT方法來計算。舉例如下：對照組基因A的CT值為20，內(nèi)參（比如βactin)CT值15。實驗組基因ACT值18，內(nèi)參CT值14。首先算加樣量：deltaCT=15。
問題2：請問:做熒光定量PCR時,△△Ct值是什么意思,它的計算公式是什么_百度知
答：△△Ct這是相對熒光定量的一個計算公式的簡化形式，用于比較不同樣品之間的差別或變化比率。Ct=-klgX0+b（線性方程）用這個方程可以通過Ct值算出樣品的起始濃度斜率=-1/lg(1+e)擴(kuò)增效率E=1,斜率=-332擴(kuò)增。
問題3：定量pcr中CT值的定義
熒光定量pcrct答：Ct值：C代表Cycle，t代表threshold，Ct值的含義是：每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定的域值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)PCR反應(yīng)的前15個循環(huán)的熒光信號作為熒光本底信號，熒光域值的缺省設(shè)置是3-15個循環(huán)的熒光信號的標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。
問題4：什么是實時熒光定量PCR?有什么作用?請詳細(xì)說明。
熒光定量pcrct答：實時熒光定量PCR即RealtimePCR(也稱實時定量PCR)定量PCR已經(jīng)從基于凝膠的低通量分析發(fā)展到高通量的熒光分析技術(shù)，即實時定量PCR。實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國AppliedBiosystems公司推出，由于該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性。
問題5：熒光定量PCRCt值很高,都是30幾,怎么辦
答：看了你空間里的溶解曲線，你可以看到溶解峰的溫度都很低，全在80以下，你擴(kuò)出來的東西多半只是引物，你跑定量的時候有做NTC的孔嗎，如果有做，可以對照NTC組和加了模板的組，溶解峰還是一樣的話，那你擴(kuò)出來的產(chǎn)物100%。
問題6：實時定量pcr的CT值在什么范圍內(nèi)算作合理
答：通常情況下，我們認(rèn)定為15到35CT比較合理，超過35個CT那么就算它沒有擴(kuò)增了，如果15之前起峰，那么就是模板濃度太高所引起的，如果發(fā)文章，那么建議你控制在15到35之間吧。
問題7：熒光定量PCR,實驗組和對照組的目的基因CT值非常相近,兩組內(nèi)參基因的CT
熒光定量pcrct答：回答如下：不正常。熒光定量pcr通過以內(nèi)參基因作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相對定量，即眾所周知的2–ΔΔCT法，（前提是要求在所有測試樣本中恒定表達(dá)的已知參照基因，而且表達(dá)水平不受研究條件及處理方式的影響）。如果實驗組和對照組的目的。
問題8：做熒光定量PCR時,△△Ct值是什么意思,它的計算公式是什么
答：△△Ct=△Ct(試驗樣品)—△Ct(基準(zhǔn)樣品)△Ct(試驗樣品)=Ct（試驗樣品,目的基因）—Ct（試驗樣品,內(nèi)參基因）△Ct(基準(zhǔn)樣品)=Ct（基準(zhǔn)樣品,目的基因）—Ct（基準(zhǔn)樣品,內(nèi)參基因）2－△△Ct=2－。
問題9：熒光定量PCR中的Ct值是指指PCR擴(kuò)增過程中,擴(kuò)增產(chǎn)物熒光強(qiáng)度首次超過設(shè)
熒光定量pcrct答：嗯，是循環(huán)數(shù)。Ct值也是一個判斷初始模板濃度高低的指標(biāo)。Ct值越低，說明模板越多。
問題10：實時熒光定量pcr因子表達(dá)量越少ct值越小嗎
熒光定量pcrct答：所謂Ct值，就是最先出現(xiàn)超過閾值信號的那個循環(huán)數(shù)?；蛘哒f是到了第幾個循環(huán)才出現(xiàn)超過閾值的信號。C代表的是cycle，循環(huán)數(shù)目，T代表的是threshold,閾值。所以表達(dá)量越少的話，需要越多的循環(huán)才能擴(kuò)增出來。也就是CT值越高。
三 ：